新冠肺炎疫情發(fā)生以來,關(guān)于核酸檢測假陰性率過高的話題,一直是各方關(guān)注的焦點。有報道稱,以熒光定量RT-PCR作為檢測手段的新冠病毒檢測的陽性率目前僅有30%—50%,導(dǎo)致奇高的假陰性率。
導(dǎo)致假陰性率發(fā)生的原因很多。2月22日,南京大學(xué)模式動物研究所發(fā)育生物學(xué)與遺傳學(xué)教授趙慶順接受科技日報記者獨家采訪時指出,依據(jù)有關(guān)機構(gòu)發(fā)布的指南,核酸檢測前需將采集到的樣品進行56℃滅活,這極有可能使新冠病毒核酸被降解,從而導(dǎo)致不能被正常檢出,最終提高了假陰性率。該研究成果《病毒核酸提取前的高溫滅活過程顯著降低可檢出病毒核酸模板量》,已在中國科學(xué)院科技論文平臺預(yù)發(fā)布。
56℃滅活可能導(dǎo)致病毒核酸被降解
2019新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈RNA。因此,科研人員的目標是在患者身上找到新冠病毒的RNA。這也是臨床診斷金標準。
目前,臨床檢測主要采用熒光定量RT-PCR試劑盒檢測。該方法是將標本中的特定RNA序列逆轉(zhuǎn)錄后進行擴增,經(jīng)過30次以上擴增后,病毒基因片段達到一定數(shù)量即可進行可視檢測。
“理論上,哪怕模板只有1個病毒,就有可能被檢測出來?!壁w慶順說,科研實踐中,在模板(病毒)量大于100個的情況下,擴增結(jié)果就會非常穩(wěn)定。
但是,趙慶順在網(wǎng)絡(luò)上看到一個教學(xué)視頻,不禁心生疑慮。該視頻由北京協(xié)和醫(yī)院和北京市衛(wèi)健委聯(lián)合制作。視頻3分08秒至3分40秒顯示:在制備核酸模板前,需將采集到的樣品在56℃條件下進行30分鐘病毒滅活。
記者在中華醫(yī)學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)分會發(fā)布的《2019新型冠狀病毒肺炎臨床實驗室檢測的生物安全防護指南(試行第一版)》中也看到:核酸擴增前,可以對標本先行消毒。包括56℃孵育30分鐘,加蛋白酶K。